食品微生物檢驗(yàn)方法有哪些?
食品微生物檢驗(yàn)方法主要分為三種:一是常規(guī)培養(yǎng)法,絕大多數(shù)方法采用此方法;二是PCR(聚合酶鏈反應(yīng))法,如致瀉大腸埃希氏菌檢驗(yàn)(GB 4789.6)、諾 如 病 毒 檢 驗(yàn)(GB4789.42);三是免疫磁珠捕獲法,如大腸埃希氏菌O157:H7/NM 檢驗(yàn)(GB 4789.36)。
對(duì)于常規(guī)培養(yǎng)法,無(wú)論是定性還是定量,都是對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)行增殖的信號(hào)放大過(guò)程:對(duì)于定量檢驗(yàn)來(lái)說(shuō),通過(guò)對(duì)微生物細(xì)胞的增殖,在固體瓊脂上形成肉眼可見(jiàn)的菌落形成單(CFU),或在液體培養(yǎng)基中形成肉眼可見(jiàn)的生物性渾濁,從而實(shí)現(xiàn)直接計(jì)數(shù)(平皿法或薄膜過(guò)濾法)或間接計(jì)數(shù)(最可能數(shù)法);對(duì)于定性檢測(cè)來(lái)說(shuō),通過(guò)前增菌及選擇性增菌,將目標(biāo)微生物的數(shù)量逐漸放大,通過(guò)選擇性平板分離檢測(cè)和生化鑒定的識(shí)別,判定目標(biāo)微生物檢出與否。
對(duì)于PCR法,其基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,可在短時(shí)間內(nèi)獲得所需的大量的特定基因片段,通過(guò)后續(xù)電泳及成像技術(shù)或熒光檢測(cè)技術(shù)對(duì)目標(biāo)微生物的特定基因進(jìn)行確認(rèn)。
對(duì)于免疫磁珠捕獲法,是將針對(duì)特定致病微生物的多抗或單抗偶聯(lián)到磁珠微球體上,將該修飾后的磁珠與待檢樣品的增菌液混合后,通過(guò)抗原抗體反應(yīng),與樣品中可能存在的靶向微生物,形成磁珠—目標(biāo)微生物復(fù)合物。在外部磁力作用下,通過(guò)該復(fù)合物在磁場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng),將目標(biāo)微生物從樣品中分離出來(lái),再通過(guò)選擇性平板分離檢測(cè)和生化鑒定的識(shí)別,判斷目標(biāo)微生物檢出與否。