最新牛奶中微生物的檢測(cè)方法，牛奶微生物檢測(cè)方法一覽

早上喝一杯牛奶，吸收豐富蛋白質(zhì)、鈣等營(yíng)養(yǎng)，有益又健康！牛奶中微生物的含量是評(píng)價(jià)牛奶質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)。但由于牛奶含水量較高，加之PH值接近中性，導(dǎo)致各種微生物都可在其中生長(zhǎng)和繁殖。牛奶微生物總數(shù)過(guò)高，會(huì)影響消費(fèi)者健康，所以牛奶中微生物的含量是評(píng)價(jià)牛奶質(zhì)量的一個(gè)重要指標(biāo)，接下來(lái)，我們來(lái)看看牛奶中微生物的檢測(cè)方法。

一、牛奶中主要微生物

1、病原微生物

2、有害微生物

3、有益微生物

二、牛奶中微生物檢測(cè)方法

1、免疫分析法

酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)的基本原理是抗原與抗體的特異反應(yīng)，將待測(cè)物與酶連接，然后通過(guò)酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用于定量測(cè)定。酶聯(lián)免疫技術(shù)的應(yīng)用，大大提高了檢測(cè)的敏感性和特異性，現(xiàn)已被廣泛地應(yīng)用于多種微生物的檢測(cè)。有報(bào)道使用ELISA方法研究檢測(cè)出生乳中的布魯氏菌。

2、PCR法

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是以待擴(kuò)增的2條DNA 鏈為模板，由一對(duì)人工合成的寡核苷酸作為引物，通過(guò) DNA 聚合酶促反應(yīng)，在體外進(jìn)行特異性 DNA 序列擴(kuò)增。PCR 技術(shù)對(duì)生乳微生物如沙門(mén)氏菌、無(wú)乳鏈球菌、大腸桿菌、單增李斯特氏菌、金**葡萄球菌和蠟樣芽孢桿菌等都能成功進(jìn)行檢測(cè)。PCR 技術(shù)具有操作簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。

3、電化學(xué)阻抗法

電化學(xué)阻抗技術(shù)的原理是細(xì)菌在培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程中，會(huì)將培養(yǎng)基中的大分子電化學(xué)惰性物質(zhì)，如碳水化合物、蛋白質(zhì)等代謝為具有電活性的小分子物質(zhì)，如乳酸鹽、醋酸鹽等，使培養(yǎng)基的電化學(xué)性質(zhì)發(fā)生變化。通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基的在電極表面體現(xiàn)的電壓、電流、電阻抗等變化情況，即可判定細(xì)菌在培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)、繁殖特性。該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是高敏感性、特異性、快速反應(yīng)性和高度重復(fù)性等。有報(bào)道運(yùn)用電阻抗技術(shù)快速分析牛奶中菌落總數(shù)，結(jié)果表明電導(dǎo)、總阻抗、雙電層電容可作為阻抗檢測(cè)參數(shù)，且檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。

4、ATP生物發(fā)光法

ATP 生物熒光技術(shù)是在熒光素酶的作用下，由ATP 激活，熒光素被氧化，發(fā)生能量躍遷產(chǎn)生熒光光子，熒光強(qiáng)度與 ATP 濃度在一定范圍內(nèi)線性相關(guān)。而ATP 在生物活細(xì)胞內(nèi)的含量大致一定。從而可測(cè)出樣品中微生物含量。有報(bào)道探索利用 ATP 生物發(fā)光技術(shù)測(cè)定生乳中細(xì)菌量的可行性;結(jié)果表明 ATP 生物發(fā)光技術(shù)具有準(zhǔn)確、便利等優(yōu)點(diǎn)，可用于生乳中細(xì)菌的快速檢測(cè)。

5、流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法

流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法通常以激光作為發(fā)光源，經(jīng)過(guò)聚焦整形后的光束垂直照射在樣品流上，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。光散射信號(hào)基本上反映了細(xì)胞體積的大小，熒光信號(hào)的強(qiáng)度則代表了所測(cè)細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，由此可通過(guò)儀器檢測(cè)散射光信號(hào)和熒光信號(hào)來(lái)估計(jì)微生物的大小、形狀和數(shù)量。流式細(xì)胞計(jì)數(shù)具有高度的敏感性，可同時(shí)對(duì)目的菌進(jìn)行定性和定量。有報(bào)道研究了應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)生乳中細(xì)菌總數(shù)的方法，結(jié)果表明流式細(xì)胞術(shù)與平皿菌落計(jì)數(shù)法相關(guān)程度為顯著相關(guān)，并該方法極大的縮短了檢測(cè)時(shí)間。